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人原代視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞的應用領域

發(fā)表時間:2025-04-14 13:42

科學家們正以前所未有的熱情探索著這一微觀世界的奧秘。這些細胞不僅是維持視網(wǎng)膜血液循環(huán)的關鍵,更是眾多眼科疾病研究的核心靶點。近年來,隨著生物技術的飛速發(fā)展,特別是高通量測序、單細胞分析以及基因編輯等技術的引入,我們對視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞的理解達到了前所未有的深度。


研究者們發(fā)現(xiàn),這些細胞在糖尿病視網(wǎng)膜病變、年齡相關性黃斑變性等常見致盲眼病中扮演著至關重要的角色。它們的功能異常,如血管通透性增加、炎癥反應加劇以及新生血管形成等,往往是疾病進展的關鍵驅動力。因此,如何通過調(diào)控這些細胞的行為,成為治療上述疾病的新策略。

細胞復蘇方法


復蘇步驟


1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍;

2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻;

3、在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞;

4、將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng);

細胞傳代方法


傳代比例


1:2(具體情況視細胞生長速度及密度決定)


傳代方法


1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;

2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,吸走潤洗的PBS;

3、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL);

4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化(1到2分鐘,難消化的細胞適當增加時間);

5、消化到細胞大部分變圓并脫落,輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml完培終止消化;

6、混勻細胞吸出,1000rpm離心3-5min,棄上清;補加1-2ml完培吹勻;

7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中,添加6-8ml完培保持細胞生長;


注意事項


不同品牌胰酶消化時間差別較大,可根據(jù)細胞形態(tài)判斷消化進程


在此基礎上,一系列創(chuàng)新療法應運而生。例如,利用抗血管生成藥物抑制新生血管過度生長,或是通過干細胞技術誘導分化出健康的視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞進行移植,都為患者帶來了新的希望。此外,基于人工智能的圖像識別技術也在該領域展現(xiàn)出巨大潛力,它能夠幫助醫(yī)生更精準地識別病變血管,從而制定個性化治療方案。


人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞領域的研究將更加注重跨學科合作,整合遺傳學、分子生物學、生物醫(yī)學工程等多領域知識,以期揭示更多關于細胞功能調(diào)控的分子機制,并推動轉化醫(yī)學研究,最終將實驗室的發(fā)現(xiàn)轉化為臨床上的有效治療手段,讓光明照進更多患者的世界。


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